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黃曲霉毒素 B1 速測(cè)卡
【產(chǎn) 品 簡(jiǎn) 介】
黃曲霉毒素 B1(Aflatoxin B1 簡(jiǎn)寫(xiě)為 AFB1)是目前已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性最強(qiáng)的一種。黃曲霉毒素 B1 對(duì)人和若干動(dòng)物具有強(qiáng)烈的毒性,其毒性作用主要是對(duì)肝臟的損害。國(guó)家質(zhì)檢總局規(guī)定黃曲霉毒素 B1 是大部分食品的必檢項(xiàng)目之一。本品的檢測(cè)靈敏度為 5ng/ml(5ppb)。
【檢 測(cè) 原 理】
本品采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù),通過(guò)單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合 AFB1-BSA 偶聯(lián)物和樣品中可能含有的 AFB1 的原理。試劑含有被事先固定于膜上測(cè)試區(qū)(T)的 AFB1-BSA 偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗 AFB1 單克隆抗體。
【樣 品 制 備】
1. 谷物:任取 5g 以上有代表性樣品并粉碎過(guò) 20 目篩,準(zhǔn)確稱(chēng)取 2.0g 均勻粉碎試樣于配套離心管中,再準(zhǔn)確加入 4ml 純凈水和 4.0ml 乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩5min,4000rpm 離心 1min 得上清液,將上清液用吸管移出 2.0ml 到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干上清液,再根據(jù)樣品的種類(lèi)按以下規(guī)定的稀釋液量,用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗,徹底溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測(cè)液??紤]不同樣品對(duì)黃曲霉毒素 B1 的最高含量要求,請(qǐng)參考下表進(jìn)行用稀釋液溶解杯底固體:
2. 飼料(以殘留限量 50ppb 計(jì)算):任取 5g 以上有代表性樣品并粉碎過(guò) 20 目篩,準(zhǔn)確稱(chēng)取 2.0g 均勻粉碎試樣于配套離心管中,再準(zhǔn)確加入 4ml 純凈水和 4.0ml 乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩 5min,4000rpm 離心 1min 得上清液,將上清液用吸管移出 0.5ml 到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干上清液,再以 2ml 的稀釋液量用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗,徹底溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測(cè)液。如果殘留限量是 30ppb,則用 1.2ml 的稀釋液溶解;如果殘留限量是 40ppb,則用 1.6ml 的稀釋液溶解。
3. 食用油:稱(chēng) 2.0g 油樣于小燒杯中,用 8ml 正乙烷分次將試樣轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,準(zhǔn)確加入 4ml 純凈水充分振蕩 3min,吸去上層正乙烷層,再加入4ml 的乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩 5min,靜置或 3000rpm 離心得上清液,將上清液用吸管移出 2ml 到小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干,再用稀釋液溶解后為樣品提取液。
4. 醬油、醋、發(fā)酵酒:稱(chēng)取 25.0g 樣品于小燒杯中,用 5ml 蒸餾水將試樣轉(zhuǎn)移到分液漏斗中,加入 20ml 三氯甲烷,加塞輕輕振搖 3min,靜置分層。放出下層三氯甲烷層,經(jīng)盛有約 5g 預(yù)先用三氯甲烷濕潤(rùn)的無(wú)水 Na2SO4 過(guò)濾器于蒸發(fā)皿中,最后用少量三氯甲烷洗滌過(guò)濾器,洗液并于蒸發(fā)皿中,用電吹風(fēng)吹干。吹干冷卻后,準(zhǔn)確加入稀釋液,將蒸發(fā)皿中的凝結(jié)物充分溶解。
【檢 測(cè) 步 驟】
1. 在進(jìn)行檢測(cè)前先完整閱讀使用說(shuō)明書(shū),使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復(fù)至室溫;
2. 從原包裝袋中取出試紙卡,打開(kāi)后平放在桌面上,請(qǐng)?jiān)?1 小時(shí)內(nèi)盡快使用;
3. 用吸管吸取待檢樣品溶液,滴加 3 滴于加樣孔中,加樣后開(kāi)始計(jì)時(shí);
4. 結(jié)果應(yīng)在 10min 內(nèi)讀取,超過(guò) 12min 的時(shí)間判讀無(wú)效。
【結(jié) 果 判 定】
1. 陽(yáng)性:位置 C 顯示出紅色線條,而位置 T 不顯色時(shí),或者位置 C 顯示出紅色線條,位置 T 顯示顏色非常模糊時(shí),判為陽(yáng)性。陽(yáng)性結(jié)果表明:AFB1 含量超過(guò)樣品允許量。
2. 陰性:位置 C 顯示出紅色線條,位置 T 同時(shí)顯示出紅色線條,且 T 線顏色接近 C 線或者深于 C 線時(shí),判為陰性。陰性結(jié)果表明:AFB1 含量低于樣品允許量。
3. 無(wú)效:位置 C 不顯示出紅色線條,而位置 T 顯示出紅色線條,該試紙卡視為無(wú)效。建議使用新的試紙卡按本說(shuō)明書(shū)要求重新測(cè)試。
【注 意 事 項(xiàng)】
1. 請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行測(cè)試,操作時(shí)請(qǐng)勿觸摸試紙顯示區(qū)。
2. 如購(gòu)買(mǎi)時(shí)發(fā)現(xiàn)過(guò)期,破損,污染,無(wú)效的產(chǎn)品,請(qǐng)到購(gòu)買(mǎi)處進(jìn)行更換。
3. 本品為一次性產(chǎn)品,請(qǐng)勿重復(fù)使用。
4. 如遇稀釋液不足,請(qǐng)用蒸餾水加入稀釋液中混勻后使用。
5. 本品為篩選試劑,任何陽(yáng)性結(jié)果請(qǐng)用其他方法做進(jìn)一步確認(rèn)。
6. 有條件的實(shí)驗(yàn)室可以用 AFB1 標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試后作為判斷參考。
【儲(chǔ)藏條件與有效期】
本品應(yīng)保存在干燥陰涼處(4--30℃),有效期 18 個(gè)月。
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